Позадина и значење на истражувањето
Во производството на вакцина против FMD, супернатантот од клеточните култури содржи голема количина на клеточни остатоци. Доколку се подложени директно на стерилизирачка филтрација од 0,2 μm, филтерските мембрани се склони кон брзо загадување, намалувајќи ја ефикасноста и потенцијално влијаејќи на пропустливоста и приносот на целниот антиген (146S вирусни честички).
Оваа студија се фокусира на три клучни прашања:
Споредба на перформансите на површинската филтрација и длабинската филтрација во однос на пропусноста, намалувањето на заматеноста и заштитата на стерилизирачките филтри низводно.
Потврдување на единствената предност на силните позитивно наелектризирани длабински филтри во отстранувањето на клеточни остатоци.
Воспоставување скалабилни шеми за филтрација прилагодени на културни течности со различни нивоа на заматеност, за да се задоволат потребите на индустриското производство.
Основни експерименти и резултати
Површинска филтрација наспроти длабинска филтрација
Експеримент:Течностите од инактивираната вакцина против FMD беа филтрирани со употреба на површинска мембрана од полипропилен од 0,45 μm и длабински филтер-листови, проследено со стерилизирачка филтрација од 0,2 μm.
Наоди:
Почетна заматеност: 77 NTU.
Длабинска филтрација:пропусен опсег 641 L/m²; намалена заматеност на 9,65 NTU (бистра и светла).
Површинска филтрација:пропустливост само 46 L/m²; заматеноста остана 41 NTU.
Стерилизирачка филтрација низводно:По длабинската филтрација, филтрите од 0,2 μm имаа пропусен опсег од 655 L/m², во споредба со само 91 L/m² по површинската филтрација - подобрување од 7,2 пати.
Принос од 146S:Повисока длабинска филтрација отколку површинска филтрација.
Заклучок:Протокот на длабинска филтрација беше 13,9 пати поголем од површинската филтрација, заматеноста на филтратот беше 76,5% помала, а векот на траење на стерилизирачкиот филтер беше продолжен за повеќе од 7 пати. И од аспект на трошоците и од аспект на приносот, длабинската филтрација е супериорна.
Позитивно наелектризирана наспроти силно позитивно наелектризирана длабинска филтрација
Експеримент:Два типа листови за длабински филтри со иста големина на порите, но различна густина на полнеж (нормално позитивно наспроти силно позитивно) беа тестирани на инактивирани FMD течности.
Наоди:
Профилите на пропустливост и притисок беа слични.
Нормална позитивна длабочинафилтер:заматеност на филтратот 25 NTU.
Силна позитивна длабочинафилтер:заматеност на филтратот 9,65 NTU (само 38,6% од нормалното).
Силниот капацитет на полнеж доаѓа од специјални лиганди на смола кои ја подобруваат електростатската адсорпција.
Извештаите од литературата потврдуваат дека силните позитивни длабински филтри можат да ги отстранат и протеините на клетките домаќини (HCP) и ДНК.
Заклучок:Силните филтри со позитивна длабочина овозможуваат значително подобро намалување на заматеноста (<10 NTU), ја штитат ултрафилтрацијата/стерилизирачката филтрација низводно и ги отстрануваат дополнителните нечистотии поврзани со процесот.
1. Технички принципи и предности на длабинската филтрација
Површинска филтрација:Ги заробува честичките само на површината на мембраната; првенствено сеење базирано на големина.
Длабинска филтрација:Ги отстранува честичките низ матрицата и со заробување и со електростатска адсорпција.
Клучни предности:
Без азбест (за разлика од раните филтри).
Направено од целулозни влакна со висока чистота, помагала за филтрирање и полимерни смоли.
Функционалните групи со позитивен полнеж обезбедуваат силна адсорпција за фини честички и нечистотии.
Целосно во согласност со биофармацевтските регулаторни барања.
2. Скалабилни шеми за филтрација за различни нивоа на заматеност
Врз основа на компаративни студии:
Нискозаматеносттечности:доволна е полесна претходна филтрација.
Среднозаматеносттечности:Препорачана е двослојна длабинска филтрација.
Високзаматеносттечности:потребна е силна позитивна длабинска филтрација за намалување на заматеноста под 10 NTU, со што се обезбедува ефикасна обработка низводно и висок принос на антигени.
3. Имплементација на производот: Филтри за длабочина на филтрација на Great Wall
„Грејт Вол Филтрејшн“ нуди системи за длабинско филтрирање дизајнирани за биофармацевтски процеси.
Клучни карактеристики:
Листови за филтрирање на длабочина со висок капацитет за отстранување на клетки, остатоци и големи цврсти материи.
Применливо за клеточни култури на цицачи, бактериски/квасни лизати.
Способно за отстранување на HCP, ДНК, вируси, ендотоксини и агенси против пенење.
Компактен дизајн, линеарно скалабилен, погоден за во линија или паралелна употреба.
Стабилни стапки на проток, долг работен век и ниски оперативни трошоци.
Заклучок
Технологијата на силна позитивно наелектризирана длабинска филтрација значително ја подобрува ефикасноста на прочистување и обновувањето на антигените во производството на вакцини против FMD. Освен FMD вакцините, таа обезбедува сигурен пат за прочистување кај други биолошки препарати. Како што продолжува оптимизацијата на биолошките процеси, напредната технологија на филтрација ќе остане неопходна за безбедно и ефикасно производство на вакцини.
Оваа статија е базирана на вистински експериментални податоци само за референца.Валидацијасе препорачува под реални услови на производство.
